“24 horas de verdad” se llama el proyecto del Nobel de la Paz 2007 que se difundirá en Internet desde las 00:00 horas del 15 de setiembre.
Con una jornada de presentaciones multimedia por Internet, el Nobel de la Paz 2007 Al Gore, anunció este lunes el lanzamiento de una nueva campaña mundial contra el cambio climático.
El proyecto se llama 24 horas de verdad y consiste en una presentación multimedia colgada en Internet y que expondrá los últimos avances científicos vinculados al cambio climático.
Al Gore, también ex vicepresidente de Estados Unidos, prometió revelar cómo quienes niegan el rol de las acciones humanas en el calentamiento global están motivados por intereses financieros.
“Habrá 200 nuevas diapositivas argumentando a favor del vínculo entre un clima más extremo y el cambio climático.
Las presentaciones serán difundidas desde distintos puntos del mundo, entre ellos Pekín, Nueva Delhi, Yakarta, Londres, Estambul, Seúl y Río de Janeiro.
Esta campaña comenzará en México a las 00:00 GMT del 15 de setiembre y terminará a las 23:00 GMT con una presentación de Gore desde Nueva York.
Se ha celebrado la Cumbre del Clima en Copenhague, donde las potencias más importantes del planeta, se han reunido, una vez más con el fin de volver a reflexionar sobre la cuestión medioambiental. La UNED, como centro de conocimiento, y desde su Cátedra de Educación Ambiental y Desarrollo Sostenible, ha querido hacerse eco de esta situación, que como muchos indican, es ya, de extrema gravedad.
Este reportaje ha recibido el Premio del Público al Mejor Programa, otorgado por ATEI, en la I Muestra Iberoamericana de Programas de Televisión Educativos.
Daros cuenta que una forma frecuente de preguntarlo es definir cada uno de los grupos. Tienes que saber definir: virus, bacterias, protoctistas y hongos (microbios en tres reinos y un grupo aparte de la clasificación en 5 reinos -los virus)
Diapositivas explicativas y ejercicios del IES Pando (Oviedo): si necesitas grabar alguna imagen, con botón derecho
Además del libro y el resumen que os he dado os puede resultar útil esta entrada o esta otra sobre todo para microbios de células eucariotas. Al ver los vídeos razonar a qué grupo pertenece cada ejemplar, de qué modo se ajusta a la definición del grupo.
Selección de preguntas por auladenaturales (IES Cervantes, Móstoles)
La secuenciación de ADN se basa en las diferencias químicas entre desoxirribonucleóticos normales y didesoxirribonucleótidos.Los desoxirribonucleótidos (naturales, normales) contienen contienen un grupo hidroxilo OH en la posición llamada 3 del anillo del azúcar (de la desoxirribosa) y la ADNpolimerasa (en enzima que fabrica ADN) puede añadir el siguiente nucleótido al extremo OH. Se puede incorporar un didesoxirribonucleólido al extremo de la cadena en crecimiento pero no contiene el grupo OH en la posición 3 por lo que tras él no se puede incorporar un nucleótido posterior. La incorporación de didesoxirribonucleótidos a la cadena paraliza la síntesis de ADN.
El ADN a secuenciar es desnaturalizado en un tubo de ensayo; la mezcla de reacción contiene
* el primer complementario a la semicadena molde -entiéndelo como un cebo de unos pocos nucleótidos ya encadenados necesario y sin el cual no comienza el alargamiento,
* la ADN polimerasa,
* los cuatro desoxirribonucleótidos naturales normales y
* un tipo de didesoxirribonucleótido que además está marcado, en este caso didesoxiA. El didesoxiA está presente a una concentración menor que su análogo normal desoxiA.
1. El primer se empareja con la secuencia complementaria y la síntesis de ADN comienza.
2. Cuando el didesoxi es insertado a la cadena en formación, la síntesis de la cadena de la que forma parte se detiene.
3. Optimizando la concentración de los didesoxiA y los desoxiA se forman cadenas cuyo alargamiento cesa en cada una de las A.
4. Los fragmentos resultantes son separados por electroforésis en gel y el marcador de los didesoxirribonucleotidos permite visualizarlos.
Se repite este procedimiento con los cuatro didesoxirribonucleótidos y si cada uno de los cuatro tipos de didesoxirrib tiene una etiqueta fluorescente diferente, las cuatro reacciones se pueden desarrollar en el mismo tubo. Cuando los productos de reacción son separados debería haber fragmento marcados de todas las longitudes en cuanto al número de bases con los cuatro tipos de bases reconocibles por cuatro etiquetas reconocibles.
* En la elecroforesis de la imagen final se han encontrado fragmentos de una sola base C -tras el primer- correspondiente al didesoxirrC marcado con una etiqueta fluorescente azul que no se ha podido alargar más por ser uno de los nucleótidos trucados;
* se ha encontrado un fragmento de 2 bases que acaba en el didesoxiT naranja trucado;
* se ha encontrado un fragmento de 3 bases que acaba en didesA con etiqueta roja...
Luego la secuencia de la cadena en formación es CTA...
INGENIOSO MÉTODO... UN POCO LIOSO HASTA QUE ENTIENDES EL FUNDAMENTO, PERO PARA ESO ESTOY YO. ADEMÁS LO VES EN OTROS VIDEOS
¿Entiendes que la secuencia averiguada desde la imagen final da como resultado GTATAGCACGCT?
Una vez que un trozo de ADN se ha ampliado, puede ser secuenciado. En este proceso, se establecen cuatro mezclas de reacción, cada uno incluyendo:
1. ADN a secuenciar
2. ADN polimerasa
3. Una fuente de nucleótidos (Adenina, Citosina, Guanina y Timina)
4. Una pequeña cantidad de la cadena de terminación de la variante de uno de los cuatro nucleótidos.
La enzima ADN polimerasa incorpora una variante de la cadena de terminación de forma aleatoria, con el tiempo se pondra fin a la cadena de nucleótidos de cada posición -posible en unos pocos cientos de bases-.
Los productos de las mezclas de reacción se ejecutan en un gel de electrofóresis, donde se encuentra la secuencia deducida por la lectura,- desde la pieza más pequeña a la más grande-.
Si las etiquetas de diferentes fluorescentes se utilizan para las bases de la variante, la secuencia se puede hacer toda en una sola reacción, las bandas pueden ser detectadas y la secuencia de lectura automática. Todo el proceso de preparación de muestras de ADN y la secuencia está ahora altamente automatizada, un desarrollo que ha sido esencial para la realización rentable y oportuna del proyecto genoma humano.
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PREGUNTAS PARA COMPRENDER LOS VÍDEOS Y ANIMACIONES
Si la animación no se carga en el blog puedes verla en McGraw
Las ENZIMAS DE RESTRICCIÓN son enzimas que cortan el ADN en secuencias específicas de nucleótidos, La secuencia reconocida tiene normalmente una longitud de cuatro a seis nucleótidos. Por ejemplo la enzima de restricción EcoR1 reconoce la secuencia GAATTC. Las dos semicadenas de ADN tienen la misma secuencia reconocible pero en sentidos opuestos. Puesto que la secuencia de reconocimiento está presente en ambas semicadenas, la endonucleasa de restricción puede unirse y cortar ambas semicadenas. Como el punto de corte frecuentemente no está en el centro de la secuencia de reconocimiento las cadenas de ADN son antiaparalelas los extremos del corte no coinciden a la misma altura; después del corte cada semicadena de ADN tiene un extemo como semicadena sencilla de unos pocos nucleótidos y ambos extremos son complementarios entre sí; es a lo que se llama "extemos cohesivos o pegajosos" LO QUE HACE A LOS ENZIMAS DE RESTRICCIÓN TAN VALIOSOS ES QUE SIEMPRE CORTAN IGUAL Y LOS FRAGMENTOS PRODUCIDOS POR UNA CIERTA ENZIMA -procedentes, por ejemplo, de dos células distintas- PUEDEN UNIRSE ENTRE SÍ. SON HERRAMIENTAS FUNDAMENTALES EN LA INGENIERÍA GENÉTICA
El primer paso para clonar un gen (clonar = copiarlo numerosas veces dentro de otro organismo) es aislar el gen deseado desde el organismo que lo contiene.
El ADN se aisla y después se fragmenta con enzimas de restricción. Los enzimas de restricción que se usan en clonación producen cortes en secuencias específicas del ADN, generando fragmentos con extremos cohesivos o pegajosos. Cada fragmento tiene una secuencia de nucleótidos de cadena sencilla en sus extremos que es capaz de hibridar con ADN que haya sido fragmentado con el mismo enzima de restricción. Los fragmentos de ADN se incorporan entonces a plásmidos. Los tipos de plásmidos usados en clonación tienen un único sitio de corte para el enzima de restricción y cuando es cortado por el enzima de restricción genera el mismo tipo de extremos cohesivos que hay en los fragmentos de ADN que van a ser clonados. Los extemos cohesivos del plásmido y del fragmento de ADN a clonar se aproximan y el enzima ligasa produce la unión definitiva. El siguiente paso es incorporar el plásmido a bacterias hospedadoras (es la trasnformación bacteriana y espontáneamente las bacterias absorben plásmidos libres que haya en su entorno). Cada célula contiene un fragmento diferente del ADN original del organismo. Todos estos tipos bacterianos representan en conjunto una biblioteca de ADN. Las células pueden ser, ahora, sembradas sobre un medio se cultivo gelatinoso (agar). La colonia de células que contiene el ADN deseado debe ser ahora identificada y aislada.
Uno de los primeros experimentos en ingeniería genética fue dirigido por Stanley Cohen y Herbert Boyer en 1973. Demostraron que el gen del ARN ribosómico de rana podía ser transferido y expresarse en células bacterianas. El primer paso fue construir el plásmido vector llamado pSC101. Este vector artificial contenía un único lugar para el enzima de restricción EcoR1 y un gen para la resistencia al antibiótico tetraciclina.
Se utilizó el enzima de restricción EcoR1 para cortar el ADN de la rana en pequeños fragmentos. Después los fragmentos de ADN se mezclaron con el plásmido vector que había sido cortado con el mismo enzima de restricción EcoR1. Los extremos pegajosos o cohesivos del ADN se asocian y se unen gracias a la ADN ligasa. Algunos plásmidos incorporan otros genes de la rana distintos del gen para ARNr y algunos plásmidos ni siquiera incorporan fragmentos de ADN de la rana. Los plásmidos son transferidos a una raza -cepa- de bacteria Escherichia coli sensible a la tetraciclina y estas bacterias son sembradas en un medio de cultivo que contiene tetraciclina. Las células que han incorporado el plásmido portador del gen de la tetraciclina crecen y forman colonias de celulas. Algunas de esas colonias están formadas por células que portan el gen del ARNr de la rana. Los investigadores comprueban la presencia del gen del ARNr de la rana en las colonias que han crecido
Hay diversas maneras de fabricarvacunas. Tradicionalmente, las vacunas han consistido en patógenos muertos o inactivos. Un segundo enfoque tradicional es usar una cepa (variante) atenuada del patógeno. Durante la atenuación, el patógeno pierde su virulencia, pero retiene muchos de sus antígenos y asi es capaz de provocar una respuesta inmune.
Las vacunas de subunidades o acelulares consisten en componentes seleccionados del patógeno como por ejemplo una estructura superfical, una macromolécula interna o el flagelo. -Son más seguras puesto que no se utiliza el organismo completo y por lo tanto no hay riesgo de una defectuosa atenuación-
Las vacunas recombinantes estan producidas mediante la clonacion dentro de un microrganismo hospedador del gen de una estructura como por ejemplo una proteína de superficie de un patógeno. Por ejemplo, el gen de la proteina superficial del virus de la hepatitis B ha sido clonado en una célula de levadura. La levadura produce la proteína superficial del virus la cual puede ser purificada del medio de cultivo de la levadura y usada como una vacuna.
Ya hemos comentado sobre una dificultad que se presenta al intentar clonar un gen de células eucariontes dentro de una bacteria debido a la presencia de intrones en los genes eucariontes.
En la mayoría de los eucariotas, los segmentos que se expresan en los genes están separados por secuencias intercaladas de nucleótidos llamadasintrones. Los intrones y los exones son transcritos por la ARN polimerasa dando lugar a un ARN mensajero inmaduro o precursor del ARNm definitivo. Después los intrones son eliminados del presursor del ARNm y los exones se unen para formar el ARNm maduro.
El ADN de las células procariotas no contiene intrones y por lo tanto las bacterias son incapaces de eliminar los intrones del ADN eucarionte y producir ARNm funcional. Por lo tantoel ADN eucarionte no puede ser clonado directamente en células procariontes para hacer proteínas eucariontes funcionales.
Antes de que el ADN eucarionte pueda ser clonado dentro de células eucariontes, debe aislarse el ARNm eucarionte y usarse este para hacer ADN sin intrones. El enzima transcriptasa inversa -obtenida de ciertos virus- se utiliza para formar a partir de ARNm purificado de una célula eucarionte en ADN de doble cadena. El ADN así resultante, llamado ADN complementario o ADNc, puede ser entonces clonado dentro de células procariontes pues pueden ser transcritos y traducidos por la maquinaria de la célula bacteriana.
Hola chicos, soy el profesor Jean. Este es mi amigo y está triste porque es diabético y necesita insulina para estar sano y contento. Hoy vamos a fabricar insulina a través de organismos modificados genéticamente. Un organismo es cualquier ser vivo como yo, tú, un árbol y también las flores; una roca no lo es. Todos los organismos están formados por células. Esta es una célula como las que puedes encontrar en un animal como los seres humanos. En la célula hay ADN y el ADN es la causa de tu identidad: produce las características que tienes como el color de ojos; aquí está el gen para el color de ojos. Tu ADN también determina tu color de pelo; este es el gen para tu color de pelo en tu ADN. Otra característica que determina tu ADN es tu altura; este es el gen de la altura.
Un organismo está genéticamente modificado cuando sus genes han sido cambiados. También hay un gen en tu ADN que fabrica insulina....
A lo largo de los últimos 30 años se han desarrollado muchas técnicas para detectar, copiar y secuenciar ADN. Estas técnicas suponen importantes avances tecnológicos, como el rápido progreso en la identificaciónde genes asociados con enfermedades y el estudio a gran escala del genoma humano completo.
Dado que proteínas y los ácidos nucleicos son grandes moléculas con muchos grupos químicos cargados, cada molécula tiene una carga neta diferente -los ácidos nucleicos tienen carga negativa-; esta característica puede usarse para separalos. El dispositivo usado para hacer esto está formado por dos láminas de plástico o vidrio con un hueco entre ellas; se rellena este hueco con una gelatina de modo que haya varios pocillos para las muestras en la parte superior. En la parte inferior hay un electrodo (el positivo) y un depósito para el buffer (sustancia que mantiene estable el pH, detalle importante para el mantenimiento estable de las cargas elécticas en las moléculas); en la parte superior otro reservorio para buffer y el electrodo negativo. Se añaden las muestras a analizar se añaden a los pocillos superiores. Habitualmente en uno de los pocillos se coloca una mezcla de moléculas de tamaño conocido llamada standards con las cuales comparar las moléculas de tamaño desconocido (a medida que se vayan separando)
Empieza el video repitiendo ideas del video anteror... La novedad a partir del minuto 1:10 está en la extracción de los fragmentos de ADN separados por electroforesis fuera de la gelatina que sirvió como soporte: esa es la técnica Southern Blot: el ADN se transfiere desde la gelatina electroforética a una membrana de nylon, algo que sucede debido a capilaridad desde la gelatina inferior hasta el nylon sobre ella, ayudado por la succión que producen las toallitas absorbentes. Antes se dasnaturalizó el ADN con el pH adecuado, lo que quiere decir que se consiguió que sus las dos semicadenas de cada fragmento en el gel se separen. Ahora entendemos el sentido de la desnaturalización: se emplea una sonda para localizar el gen buscado. La sonda es un pequeño trocito de ADN o ARN monocatenario y radiactivo_-para hacerlo visible- de secuencia conocida y con la cual vamos a localizar el gen buscado. Así por ejemplo, si sé que la insulina tiene la secuencia de aminoácidos Pro-Pro-Leu-Val..., fabrico el ARN relacionado con ella y puedo utilizar este ARN de 12 nucleótidos -con algún elemento radictivo en su composición- para localizar el gen de la insulina dentro de todo el conjunto: lo uso como sonda
En la hibridación Southern, sondas -o probes- hibridan con el ADN que está situado en determinadas posiciones de un filtro -la membrana de nylon que antes decíamos-. Los fragmentos de ADN se han separado con anterioridad mediante una electroforesis en gel, luego han sido desnaturalizados en el gel y más tarde han sido transferidos al filtro por acción de la capilaridad: una solución salina migra desde la esponja empapada situada bajo la gelatina y a través del gel hasta el filtro, transportando las moléculas de ADN desde el gel hasta el filtro.
Se coloca el filtro en una bolsa, con sondas marcadas (labelled probes) para permitir que suceda la hibridación. Lavando el filtro, se retiran las sondas en exceso que no se han unido específicamente con el ADN del filtro. La radiación emitida por las sondas marcadas -recuerda que son sintéticas y contenían algunos átomos radiactivos- produce bandas negras en una película de rayos X. La comparación entre la posición de las sondas unidas al filtro con una foto del gel original permite identificar el/los ADN complementario/os a la/las sonda/as
La técnica Southern Blot (mancha de Southern) se utiliza para verificar la presencia o ausencia de una secuencia de nucleótidos específica en el ADN de distintas fuentes y para identificar el tamaño de los fragmentos de restricción que contienen la secuencia.
En este procedimiento, el ADN es aislado de cada fuente, y digerido con una enzima de restricción específica.
Los fragmentos de restricción de ADN son cargados en un gel de agarosa y los fragmentos son separados por electroforesis según su tamaño. Los fragmentos más pequeños migran más rápido que los grandes.
El ADN es transferido del gel frágil a un filtro de nylon.
Luego se añade la sonda de ácido nucleico marcado radiactivamente.La sonda se une a los segmentos de ADN complementarios. Observa que el segmento de ADN que está siendo buscado no esta presente en el organismo B.
Para detectar la posición de la sonda radiactiva, la membrana de nylon se cubre con una película de rayos-X. Después del revelado, las posiciones de la sonda se hacen visibles.
A menudo se requiere detectar un cierto fragmento de ADN o ARN de nuestro interés dentro de una mezcla de muchos fragmentos con secuencias diferentes. Una manera de hacerlo es mediante la hibridación. El término hibridación se refiere al proceso en el cual dos fragmentos complementarios de ADN o uno de ADN y otro de ARN se unen para formar una molécula de dos semicadenas. El fragmento de ADN o ARN usado para detectar secuencias complementarias se denomina "probe" (sonda). Si la sonda está marcada por ser radiactivo o fluorescente, los fragmentos de ADN o ARN con los que hibrida resultan marcados y pueden ser detectados. Antes de realizarse la hibridación, la doble cadena de ADN debe separarse en semicadenas sencillas (desnaturalizarse); la desnaturalización se consigue calentando la muestra. Entonces las semicadenas sencillas podrán hibridar con semicadenas sencillas complementarias que haya en el entorno, incluídas las de las sondas marcadas.
- ¿Qué es la huella genética? Es una técnica utilizada por los científicos para distinguir entre individuoas de la misma especie, usando muestras de ADN.
- ¿Quién inventó la técnica? Alec Jeffreys, en la Universidad de Leicester en 1985. Recibió el título honorífico de "Sir" en 1994
- Etapas del proceso de obtención de la huella genética:
a) Se rompen las células para liberar el ADN. Si sólo se dispone de una pequeña cantidad de ADN, debe ser amplificado usando la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR explicada en una entrada posterior)
b) El ADN es fragmentado usando enzimas de restricción. Cada enzima de restricción corta el ADN en una secuencia específica de bases. Los segmentos de ADN resultantes son llamados "fragmentos de restricción". Esta etapa proporciona cientos de fragmentos de restricción de diferentes tamaños porque las secuencias de bases cortadas pueden estar distantes (originando fragmentos largos) o cercanas (originando fragmentos cortos)
c) Los fragmentos se separan en base a su tamaño usando el procedimiento llamado "electroforesis de gel". Los gragmentos de ADN son inyectados en los pocillos y se aplica una corriente eléctica al gel. Como el ADN está negativamante cargado, es atraído por el extremo positivo del gel; los fragmentos de ADN más cortos se mueven más rápido que los fragmentos largos. Se añade un material radiactivo que se combina con los fragmentos de ADN produciendo una imagen fluorescente. Así se obtiene la copia fotográfica de las bandas de ADN.
d) Es entonces cuando se puede analizar el patrón de distribución de los fragmentos. La huella genética es utilizada por los forenses para resolver crímenes y problemas médicos: el perfil genético de cada individuo es altamente específico; la probabilidad de que dos personas tengan exactamente el mismo prfil genético es de 1/30.000 millones (hay alrededor de 7.000 millones de habitantes en a tierra) salvo para los gemelos univitelinos.
* Materiales biológicos usados para tomar muestras: sangre, pelo, saliva, semen, tejidos celulares, restos de células vaginales en el exterior de un condón...
* Protocolo para resolver delitos:
- Se comparan el modelo de perfil genético de víctima y sospechoso. Si el perfil genético coincide con el del sospechoso, existe una fuerte prueba de que el sospechoso estuvo presente en la escena del delito (aunque no prueba que lo cometiera). Si el perfil genético del sospechoso no encaja, el sospechoso debe ser eliminado de la investigación.
- Ejemplo: se ha cometido un asesinato; el equipo forense rcoge muestras de sangre de la escena del crimen. Se prepara el perfil genético de la muestra de sangre, de la víctima y del sospechoso. En la imagen ves que la muestra de sangre corresponde al sospechoso, que este estuvo, por tanto, en la escena del crimen.
* Resolución de problemas médicos: la técnica puede ser usada para determinar si una persona en concreto es el padre/madre de un niño en casos relativos a paternidad, herencia, inmigración...
- Ejemplo de un test de paternidad: comparando el perfil genético de la madre y del niño es posible identificar fragmentos en el niño que están ausentes en la madre y que por lo tanto han sido heredados del padre biológico. Date cuenta que tanto la madre como el padre sólo transmiten un cromosoma de cada pareja de homólogos al hijo, por lo que NO TODAS LAS SECUENCIAS maternas están en el hijo ni todas las secuencias paternas están en el hijo. En el ejemplo el hombre es el padre biológico del nino puesto que las secuencias que el niño no tiene de la madre coinciden con secuencias del hombre.
Las enzimas de restricción reconocen secuencias de nucleótidos muy específicas en el ADN.
Los ADNs de diferentes individuos raramente tienen el mismo orden de sitios de restriccion y distancias entre estos sitios. Por lo tanto, se dice que la población es polimórfica (tiene diferentes formas) para estos patrones de fragmentos de restricción.
Estas diferencias se denominan polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLPs). Diferencias así aparecen por mutaciones.
Cortando una muestra de ADN con una enzima de restricción concreta se obtienen fragmentos de ADN de diferente longitud. Estos fragmentos se separan por electroforésis en gel. Así resulta un patrón de bandas que es único para el organismo analizado. Esta "huella genética" es usada por los forenses durante una investigación criminal. RFLPs también es útil como marcadores para identificar un grupo concreto de gente con riego de padecer ciertos problemas de origen genéticos.
POR SUPUESTO LO PRIMERO QUE TIENES QUE TENER CLARO EN ESTE APARTADO ES EL DESARROLLO DE LA MEIOSIS PARA ASÍ DOMINAR LA DOTACIÓN GENÉTICA DE LOS GAMETOS QUE INTERVENDRÁN EN LOS CRUZAMIENTOS
(en la diapositiva 8 de la presentación hay enlaces a problemas comentados y resueltos)
También son muy didácticas las explicaciones a nivel de 4º ESO del IES Pando (Oviedo) y las correspondientes a 2º de Bachillerato(hacia arriba de la página del IES Pando, seleccionando la opción "diapositivas" te será más cómodo avanzar por las mismas)
Y muy claros los problemas de Raúl Martínez(refresca las ideas con el apartado "teoría")
